Kryokonzervace spermatu: senzitivita, postupy a význam pro budoucí oplodnění

Kryokonzervace spermatu je zdravotní výkon, který umožňuje zachovat plodnost mužů v různých situacích: před medicínskými zákroky, rizikovými povoláními, léčbami nebo při obtížích se samotným získáním spermií. Označení zdravotního výkonu Kryokonzervace spermatu a jeho uchování ve spermabance zahrnuje účel, povahu, předpokládaný prospěch, následky a možná rizika zdravotního výkonu. Po léčbě některými léky nebo zářením se spermiogram léčeného muže výrazně zhoršuje, případně klesá počet spermií v ejakulátu na nulu. Někdy je tato porucha vratná, např. po 2 nebo i 10 letech se může tvorba spermií obnovit, jindy je však nevratná.

Principy a postup kryoponzervace

Chceme-li sperma uchovat, musíme ho zamrazit. Sperma smísíme s ochranným roztokem a ve speciálním přístroji postupně ochladíme až na teplotu -196 stupňů Celsia, tedy na teplotu kapalného dusíku. Při této teplotě je zmrazené sperma, které nazýváme kryospermatem, uchováváno ve speciální kryonádobě. Po rozmrazení se přeživší spermie začnou znovu pohybovat a mohou oplodnit vajíčko. Zmrazíme-li sperma před léčbou, máme zásobu spermií pro budoucí oplození partnerky. Kvalita spermií zůstává zachována, zamražení přežije zhruba 80 %. Po rozmražení se může zhoršit kvalita, nelze však toto stanovit předem, neboť je zcela individuální. Pravděpodobnost otěhotnění ani zdravotní stav narozených dětí se neliší, ať už bylo použito spermatu zmrazeného nebo čerstvého.

Indikace a rizika kryokonzervace

Kryokonzervace je vhodná zejména pro muže, kteří vykonávají riziková povolání nebo sporty, pohybují se v prostředí se zvýšenou koncentrací škodlivých látek nebo pro muže, kteří se potýkají se zdravotními problémy. Ačkoliv lze spermie zamrazit téměř v jakémkoliv věku, doporučujeme zamrazení neodkládat. Pacient je seznámen s postupem a podmínkami celého procesu, který se skládá z laboratorního vyšetření spermatu (spermiogram), konzultace výsledků a následného zamrazení požadovaného počtu dávek (slámek).

Po dvou až sedmi­denní abstinenci muž získá vzorek spermatu masturbací do sterilní nádoby. Vzorek pak předá k hodnocení do laboratoře. Pokud muž není schopen získat vzorek v centru reprodukční medicíny, je možné provést odběr do předem vyzvednuté nádoby v domácím prostředí. Ejakulát musí být dodán do laboratoře do 2 hodin po odběru a po odevzdání je nutné jej nechat zkapalnět zhruba 20 minut. Následně je provedeno mikroskopické zhodnocení, které se zaměřuje na koncentraci spermií, jejich pohyblivost a morfologii (tvar).

Požadavky na odběr a počet dávek

Na základě výsledků spermiogramu a důvodu kryokonzervace se s pacientem stanoví, kolik slámek bude zamrazeno. Z jednoho odběru spermatu lze většinou získat asi 5-12 pejet, přičemž při oplození se obvykle použije 1-2 pejety. Zásoba pejet tedy dává dobrý předpoklad k dosažení těhotenství.

Možnosti získání spermií a jejich rizika

Nelze-li získat sperma masturbací, je možné též spermie odebrat chirurgickým způsobem. Provádí se odběr mikrochirurgicky (pod optickým zvětšením) odsátím spermií z kanálků nadvarlete (MESA). Druhou možností je bioptické získání tkáně z kanálků nadvarlete (TESE). Předpokládaná doba hospitalizace je u obou zákroků 1-3 dny.

Průběh zdravotního výkonu: Sperma získá muž masturbací v samostatné odběrové místnosti. Někdy muž takto nemůže získat sperma. V tomto výjimečném případě může donést sperma z domova, při splnění podmínek pro jeho získání a uchování. Obdobná možnost existuje, pokud pacient nemůže opustit nemocnici, kde je hospitalizován, i tehdy je však nutné odběr provést do nádobky poskytnuté personálem. Sperma se smíchá s kryokonzervačním roztokem. Emulze se spermiemi se plní do tenkých trubiček, zvaných pejety, opatřených identifikačním štítkem.

Z jednoho odběru lze získat většinou 5-12 pejet; při oplození se obvykle použije 1 nebo 2 pejety. Zásoba pejet dává dobrý předpoklad k dosažení těhotenství. Po odevzdání vzorku je důležité dodržet podmínky pro jeho rychlé zpracování a uchování v kryobankách.

Biologické a klinické souvislosti kryokonzervace

Důležitým aspektem oplození je vzájemná komunikace proteinových sítí, které se nacházejí na vajíčku i na spermii. Tyto proteinové komplexy procházejí změnami a přeskupováním v průběhu pohybu spermie reprodukčním traktem, kdy dochází ke zrání spermie. Pouze kvalitní spermie je schopna projít klíčovými změnami, které završují schopnost spermie proniknout obaly vajíčka díky akrozomální reakci.

V rámci výzkumu se studovalo chování a dynamika proteinů při maturaci spermií a akrozomální reakci. Výstupy mají praktický přesah do asistované reprodukce v humánním lékařství a veterinární praxi. Projekt vedla Laboratoř reprodukční biologie BIOCEV; do tříletého projektu bylo aktivně zapojeno pět odborných pracovníků a studenti, s dokončením doktorských a diplomových prací. Spolupráce s mezinárodními týmy pokračuje i po ukončení projektu a je posílená publikacemi a přednáškami na mezinárodních konferencích.

Infekce a jejich vliv na plodnost

Bakteriální infekce v pohlavním ústrojí muže mohou mít negativní vliv na spermatogenezi a sekretorickou funkci přídatných pohlavních žláz. Patří sem infekce Neisseria gonorrhoeae, Treponema pallidum, Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum. Infekci často doprovází leukocytospermie a tvorba reaktivních forem ROS, což zhoršuje parametry spermatu. Některé infekce mohou probíhat bezpříznakově.

Omes et al. (2020) zkoumali diagnostiku mužské neplodnosti spojené s bezpříznakovou bakteriální infekcí pohlavního ústrojí a vyvinuli test na hladiny MPO a LAC proteinů v ejakulátu. Tento test měl diagnostickou přesnost 67 %, senzitivitu 74 % a specificitu 60 % a může sloužit jako doplněk k běžnému spermiogramu.

Součástí standardní péče o pacienta je informování o možnostech kryokonzervace, probíhajícím vyšetření spermiogramu, konzultaci výsledků a následném zamrazení požadovaného počtu dávek. Před zamrazením je důležité seznámení s riziky a výhodami, aby pacient věděl, co ho čeká a co může očekávat po rozmražení.

Praktické shrnutí procesů a výsledků

• Odběr spermatu v optimálních podmínkách a časově vhodný pro analýzu.
• Hodnocení spermiogramu: koncentrace, pohyblivost, morfologie.
• Rozhodnutí o počtu slámek podle důvodu kryokonzervace a výsledků spermiogramu.
• Odběr spermií z nadvarlate nebo testikulární tkáně jako alternativa při nemožnosti masturbace.
• Expedice a uchování v kryobankách do teploty kapalného dusíku (-196 °C).

Tabulka: klíčové kroky a rychlosti

tags: #senzitivita #spermii #ke #kryokonzervaci